考马斯溶液怎么配制
2025-05-25 20:59:37
郭老师
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考马斯亮蓝溶液的配制方法如下，分两种常见配方说明：
一、考马斯亮蓝G-250溶液配制（常规染色液）
试剂组成
- A液：
1 mol/L 盐酸溶液
- B液：1 g/L 考马斯亮蓝G-250溶液
- 混合比例：1 mL A液 + 15 mL B液，加水至1 L。
关键要点
- 需在染色时现场混合，避免提前配制导致沉淀或颜色异常。
二、考马斯亮蓝R-250脱色液配制（用于蛋白质纯化）
试剂组成
- 考马斯亮蓝R-250：
0.25 g（或0.5 g，按比例调整）
- 溶剂：甲醇45 mL + 冰乙酸10-100 mL（根据浓度需求调整） + 蒸馏水450-850 mL
- pH调节：通常使用冰乙酸调节至pH 5.0-6.0。
配制步骤
- 称取考马斯亮蓝后溶解于溶剂中；
- 加入冰乙酸调节pH；
- 定容至1 L，过滤后冷藏保存。
注意事项
两种配方中，G-250与R-250为不同类型考马斯亮蓝，用途不同（G-250用于染色，R-250用于蛋白质脱色）；
配制时需严格按比例操作，确保浓度准确；
常规染色建议现配现用，脱色液可长期保存。
